Jag tror nog att alla var lite spända inför den första dagen på mentorskapet. Under helgen innan hade vi kopplat av med midsommarfirande och hajk efter en första vecka fylld av "mini-forskning", men nu var det alltså dags att påbörja de verkliga projekten! På morgonen gjorde vi oss i ordning och tog oss, efter en hastig frukost, till tåget. Under tågresan satt jag och mina projektpartners och stresspluggade lite inför vårt kommande projekt, som handlade om en proteindomän vid namn Bri2 BRICHOS, som enligt vissa studier visat förmåga att tränga igenom blod-hjärnbarriären.
Vi klev av vid Huddinge och fick rusa i regnet till Karolinska Institutet då vi var lite sena... lyckligtvis kom vi fram i tid! Vår mentor mötte upp oss vid entrén och ledde oss upp till ett kontor där vi blev tilldelade varsitt skrivbord. Därefter fick vi våra inträdeskort och gjorde en rundtur i labbet, där hylla efter hylla stod proppfull med kemikalier och labbutrustning – otroligt häftigt!
Vårt projekt gick ut på att använda immunofluorescens på endotelceller som inkuberats med Bri2 BRICHOS under olika tidsperioder, för att kunna mikroskopera och se hur proteindomänen rört sig genom cellagret. Immunofluorescensmärkning går ut på att man använder olika antikroppar som binder till proteindomänen respektive specifika antigener på olika organeller i endotelcellerna. Genom denna teknik kunde vi alltså lokalisera proteinets väg genom lagret av endotelceller genom att analysera var proteindomänen och till exempel endosomer kolokaliserade. Därigenom kunde vi avgöra vilken transportväg som var vanligast av de vi lokaliserat.
Summer, Paulina och Eljona pipetterar i labbet på KI.
Den första dagen fick vi öva på att pipettera och hålla med pincett i små insatser där cellkulturerna odlats på plastmembran i botten (eftersom vi bara övade fanns det inga celler i våra insatser). Sedan fick vi öva på att skära loss membranet i botten samt placera det på mikroskopglas. Dagen efter fick vi börja experimentera med våra celler! Under vårt första "riktiga" labbpass lyckades jag (trots att jag höll mycket hårt i pincetten) tappa en av mina små insatser med ömtåliga celler – först på min labbrock, sedan på bordet och även en gång på golvet... (på något underligt vis var det alltid samma insats av mina tre som ramlade).
Just när alla trodde att spektaklet var över, bad min mentor mig att räcka över en liten låda med helt nya, rena pipett-tips. Jag lyfte lådan, som slank ur mina händer och tömde ut sitt innehåll över mina cellinsatser. (Tur i oturen: ingenting hamnade i insatserna!) En av mina labbpartners tittade bara undrande på mig och försökte kväva en skrattattack medan jag generat samlade upp alla oförbrukade tips och slängde dem.
Resten av laborerandet under veckan gick galant och inga fler insatser föll. På fredagen var det dags att ta bilder på våra färdiginkuberade celler med ett konfokalmikroskop för att sedan kunna analysera dem. Alla satte sig runt en stor datorskärm i det mörklagda mikroskoprummet och såg på medan vår mentor tog bilderna. Vi fick inte röra någonting, då det krävs en särskild utbildning för att veta hur man hanterar det ömtåliga och mycket dyra mikroskopet.
Mina celler var de första som fotades i mikroskopet. Stämningen var spänd och jag höll andan i väntan på att bilderna skulle dyka upp på skärmen: skulle det överhuvudtaget finnas några celler att analysera i cellkulturen från insatsen jag tappat så många gånger? Bilderna kom slutligen upp på skärmen och till allas stora lättnad var cellerna intakta och fina!
Här är ett vackert foto av cellkulturen som klarade sig trots många fall. De rosa fläckarna motsvarar proteindomänen (Bri2 BRICHOS), de mörkblå visar märkning av DNA:t, de ljusblå fläckarna (mycket få i just detta foto) är märkningar av transportvesiklar – blåsor i cellen som transporterar material som tagits upp av cellen – och det gula motsvarar cellernas cytoskelett, vilket är en del av cellens struktur.
Trots den tumultartade uppstarten på labbet var det obeskrivligt fascinerande, roligt och lärorikt att få vara en del av verklig forskning. Min uppmaning till er som läser detta och funderar på att söka till RAYS: Sök! Sök! Sök!
// Eljona